Use of RT-qPCR with combined intercalating dye and sodium lauroyl sarcosinate pretreatment to evaluate the virucidal activity of halophyte extracts against norovirus

RT-qPCR 기반의 프로피디움 모노아지드 염색약과 사르코실 전처리를 이용한 염생식물 추출물의 항바이러스 효과 연구

본 연구는 빛에 반응해 유전체 층간 결합을 유도하는 염색제인 PMA (Propidium monoazide)와 PMA 활성을 증폭시키는 계면 활성제 물질 사르코실(sarkosyl)을 전처리하여 노로바이러스 제어 효과를 연구했다.

5종의 염생식물(칠면초, 함초, 아이스플란트, 세발나물, 갯방풍)로부터 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올 분획 추출물을 확보했다. 50 μg/mL과 100 μg/mL의 분획 추출물을 각각 30분과 60분으로 구분하여 처리한 결과, 칠면초와 함초의 부탄올 분획 추출물(100 μg/mL, 60분) 처리군이 2 log genomic copies 이상의 감소효과를 나타냈다.

처리시간이 늘어날수록 노로바이러스 감소효과는 증가했으며 최대 12시간 처리한 결과  약 3 log 감소효과를 나타냈다.

이는 배추절임 단계에서 함초와 칠면초의 부탄올 분획 추출물을 첨가할 경우 노로바이러스를 제어할 수 있는 가능성을 확인시켜준 의미 있는 결과로 입증됐다.

또한 기존의 유전자분석법을 활용할 경우 감염성이 없는 노로바이러스도 검출되어 거짓양성(위양성) 반응을 보이는 실험적 한계성을 극복하기 위해 PMA와 사르코실 전처리를 적용함으로써 거짓양성 반응을 최소화했다.

본 연구를 통해 감염성이 있는 노로바이러스만 선택적으로 검출함으로서 염생식물 추출물의 항바이러스 효과에 대한 신뢰성을 향상시켰을 뿐 아니라 항바이러스 물질의 활용 가치와 산업적 활용의 가능성을 높였다.